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养殖场非洲猪瘟病毒变异株防控手艺指南 | ||
2022-01-01 15:33:16 | ||
养殖场非洲猪瘟病毒变异株防控手艺指南
中国动物疫病预防控制中心 国家非洲猪瘟区域实验室(广州)
为指导养殖场实时发明非洲猪瘟病毒变异株,提升非洲猪瘟 防控能力,制订本手艺指南. 一、病毒特点 非洲猪瘟病毒变异株包括基因缺失株、自然变异株、自然弱毒 株等.与2018 年传入的非洲猪瘟病毒毒株相比,变异株基因组序 列爆发差别水平的改变,包括核苷酸突变、缺失、插入或短片断替 换等,部分变异株失去红细胞吸附活性. 从生物学特征看,部分病毒单基因缺失株的致病力与熏染剂 量呈相关性,病毒双基因缺失株熏染猪可间歇性排毒,病毒可以水 平撒播.部分失去红细胞吸附活性的变异株具有水平撒播能力, 高剂量熏染能引起亚急性或慢性病程,部分猪只殒命,低剂量熏染 引起非致死性的一连熏染。从撒播性看,非洲猪瘟病毒变异株临 床撒播性与经典毒株无显着区别。从临床特点看,临床症状不典 型,与2018 年传入毒株有显着差别,常体现为采食量下降、体表发 红、皮肤坏死、淋投合肿大、肺炎等症状;显微镜下多器官特殊是淋 ─ 3 ─ 投合和肾脏可见伴有梗塞和血栓的坏死和出血区,以及慢性纤维 化病变。,从易感性看,妊娠母猪和育肥猪的易感性无显着差别,妊 娠母猪群体生产性能受影响较大.病毒熏染潜在期事后,母猪表 现重复发热,不食等症状,部分母猪泛起流产、高比例死胎、乳房结 痂等症状;初生仔猪活力差;育肥群静止状态下的症状不显著,应 激情形下可排毒,体现皮肤坏死,枢纽肿大,脾脏肿大、坏死等临床 症状和剖检转变。 二、防控难点 (一) 隐藏性强 非洲猪瘟病毒变异株熏染潜在期长,病猪初期无临床体现或 临床症状不典范,致死率较低,不易被识别.熏染变异株的猪群口 腔排毒滞后,排毒不纪律,采样检测很难实时发明,导致猪群隐性 带毒并间歇性排毒,很难做到精准扫除,并且经多次转群、并群等 操作,熏染源可能遍布多栋猪舍,泛起多点同时发病的特点.实践 中,常有猪场在实时荧光定量PCR 要领检测时Ct 值较高,但因猪 只临床体现康健,未能实时接纳有用步伐,致使猪只在应激和混淆 熏染等因素诱发下发病。 (二) 检测难度大 非洲猪瘟病毒变异株熏染前期病毒滴度较低,熏染后爆发抗 体延迟,通例判别诊断要领有局限性,在泛起变异株的情形下,容 易造成误判.别的,过高频次的全群普查也会增添交织污染或扩 一 4 一 散危害.因此若是监测计划和检测要领选择不当,有可能造成病 毒撒播和扩散。 三、防控步伐 (一) 增强临床巡视 做好手艺培训,提高饲养职员识别能力,一旦发明猪只泛起嗜 睡、轻触不起、采食量镌汰、拱料不食、发热、皮肤发红、枢纽肿胀/ 坏死、咳喘、腹式呼吸,育肥猪死淘率增高,母猪流产或泛起死胎/ 木乃伊胎等可疑临床体现时,第一时间采样检测.有条件的养殖 场可使用红外线热成像仪对所有猪群举行逐日一次的体温监测, 发明体温异常猪只,实时举行采样检测.通过逐日体温筛查,镌汰 猪场采样频次,抵达降本增效目的. (二) 优化监测计划 针对变异株的病原特点,优化监测计划.逐日开展猪场场内 巡栏,监测猪群临床症状和体温转变.按期开展场外情形采样检 测。每周对猪群举行病原和抗体监测。监测采样时可对全群举行 20~30% 比率的抽样检测.在猪群举行疫苗接种、转群、去势,或 母猪临盆后,开展抽样检测.一旦猪只泛起疑似临床症状,连忙采 样检测。 育肥猪群:猪场发明临床异常猪只后,连忙对育肥猪群举行大 栏棉绳口腔液采样,实时送检举行病原检测. 产房:在母猪临盆后,收罗脐带血、胎衣或胎衣液等样品以及 一 5 一 母猪口鼻拭子团结尾根血混样样品举行病原检测。 病死猪:在确保养殖场内生物清静的情形下,实时收罗病死猪 淋投合、肺脏等样品在当天送检。有研究报道非洲猪瘟病毒变异 株在猪淋投合、肺脏病毒载量最高,收罗响应组织样品举行检测, 可提高检出率。 情形:按期对猪场内料槽、风机等举行情形样品检测。国家非 洲猪瘟区域实验室(广州)研究发明,养殖场内料槽样品的病毒核 酸检出时间早于猪只泛起异常临床症状的时间。 (三)科学采样检测 国家非洲猪瘟区域实验室(广州)研究发明,接纳口鼻拭子联 合尾根血混样,或口鼻拭子团结腹股沟淋投合穿刺混样的检测采 样要领,可提高病原检出率.同时还应当收罗临床异常猪的前腔 静脉血或尾静脉血,疏散血清后举行非洲猪瘟病毒抗体检测. 采样:使用聚丙烯材质拭子,阻止使用头部为棉花制品的拭 子、含海藻酸钙拭子以及木柄拭子,避免棉花纤维对卵白质吸附影 响病毒洗脱效果及抑制PCR反应的物质影响检测效果。 样品生涯:样品生涯管应使用无菌、对核酸无吸附作用的螺旋 盖塑料管。每个样品管应再套一个样品袋避免样品泄露和污染。 新鲜收罗的临床标本应在2~8 ℃条件下,在收罗后2~4h 内送至 实验室.用于病毒疏散和核酸检测的样品应当尽快举行检测,能 在24h内检测的样品可置于4℃生涯;24h 内无法检测的样品则应 ─ 6 ─ 当置于-70℃或以下生涯(如无-70℃生涯条件,则于-20℃冰箱暂 存)。 病原检测要领:可接纳非洲猪瘟病毒(P72/CD2v/MGF) 三重 实时荧光定量PCR 要领,也可接纳发明专利 CN112646934B提供 的非洲猪瘟病毒(P72/EGFP/mChery) 三重实时荧光定量PCR 方 法检测病毒核酸.对很是见基因变异且临床症状特殊的病例,需 进一步送相关实验室举行全基因组测序判别。 抗体检测要领:接纳《非洲猪瘟诊断手艺》(GB/T18648) 划定 的间接 ELISA、阻断 ELISA 等要领举行抗体检测。 (四) 强化生物清静防护步伐 我国非洲猪瘟防控实践批注,落实好常态化防控步伐能有用 阻止非洲猪瘟病毒熏染.针对非洲猪瘟病毒变异株的盛行特点, 要一连从人、车、物、猪等方面强化防控步伐。 1.职员治理 职员在进场前3天不得去菜市场、猪场、屠宰厂(场)、无害化 处理厂(场) 及动物产品生意营业市场等生物清静高危害场合.凭证 差别区域生物清静品级举行职员治理,职员遵照单向流动原则,禁 止逆向进入生物清静更高级别区域。 进入办公/生涯区域职员:要替换清洁消毒过的衣服及鞋靴, 洗手消毒并有用淋浴后,方可进场,淋浴时必需注重指甲的洗濯. 实践批注,一次有用的淋浴(沐浴露和洗发水淋浴5分钟以上) 可 一 7 一 以消除职员体表携带的病毒;随身物品经消毒后入场,严禁携带猪 肉制品入场;未经允许,榨取进入生产区.进入生产区前,职员要 在生产区淋浴间沐浴,所携带物品须经生产区物资消毒间消毒后, 方可带入。 进入猪舍的流程:职员凭证划定蹊径进入各自事情区域,榨取 进入未被授权的事情区域。每栋猪舍入口处都应该安排消毒盆 (桶)、洗手消毒盆.收支猪舍前注重洗手,洗濯、消毒事情靴,程 序为先刷洗鞋底、鞋面污物,后在脚踏消毒盆(桶) 浸 泡 消 毒 .人 员脱离生产区,将事情服安排含有消毒剂的桶中浸泡消毒.严禁 饲养职员互串猪舍。 2.车辆治理 猪场车辆治理:主要包括外来运猪车、饲料运送车、网络死猪/ 猪粪车、私人车等外部车辆;内部运猪车、拉料车、运死猪/猪粪车 等内部车辆。外部车辆进入场区需经彻底洗濯、消毒、烘干。 外来运猪车治理:外来运猪车应为在畜牧兽医部分挂号的备 案车辆,经由洗濯、消毒及干燥后,方可靠近猪场出猪台或中转站 ( 台) .运输后对车辆所经蹊径举行彻底消毒. 饲料运送车治理:饲料运送车停放在场区外清静距离,对车体 和车轮举行消毒,卸下饲料后,由场内职员对饲料外包装外貌消 毒.建议设置中转料塔、场内饲料运输车,饲料可从场外直接运送 到中转料塔,运输车辆不必进入猪场内. ──8── 内部运猪车治理:选择场内空间相对自力的所在举行车辆洗 消和停放。运猪车使用完毕后连忙到指定所在洗濯、消毒及干燥。 流程包括:洗濯,确保外貌无污物;清洁剂处理有机物;消毒剂喷洒 消毒;充分干燥. 死猪/猪粪运输车治理:死猪/猪粪运输车专场专用。交接死 猪/猪粪时,阻止与外部车辆接触,交接所在距离场区大于100~ 200 米.使用后,车辆实时洗濯、消毒及干燥,并消毒车辆所经道 路。 3.物资治理 猪场物资治理主要包括食材、生涯物资、兽药疫苗、饲料、装备 以及其他入场物资的治理。 入场食材治理:在入场食材的选取上,要求食材生产、流通背 景清晰、可控,无病原污染;榨取生鲜猪肉及制品入场;蔬菜和瓜果 类食材无土壤、无烂叶,禽类和鱼类食材无血水,经食物消毒处理 后入场.进入生产区的饭菜,应由猪场厨房提供熟食,生鲜食材禁 止进入;饭菜容器经消毒后进入. 入场兽药疫苗治理:严酷执行进场消毒,疫苗及有温度要求的 药品,拆掉外层包装,使用消毒剂浸泡消毒后再转入贮存或立纵然 用.其他通例药品,拆掉外层包装,经烘干、或臭氧、或熏蒸消毒, 转入贮存或立纵然用。严酷凭听说明书或规程贮存、使用疫苗及 药品,疫苗瓶和注射器等医疗放弃物实时无害化处理. ─ 9 饲料治理:榨取从疫区购置玉米等饲料质料,确保饲料无病原 污染.相识购进的全价饲料是否含有动物源性饲料添加剂,阻止 饲料中添加动物源性饲料添加剂,特殊是乳猪料.饲料经充分干 燥或加热熟化后使用,所有饲料包装袋均充分消毒(臭氧或熏 蒸).榨取饲喂餐厨剩余物. 4.猪群治理 阻止场外散养或放养:阻止场外散养和放养模式,避免家猪与 野猪接触,采食扬弃的垃圾食物. 实验"全进全出"治理制度:"全进全出"模式是猪场饲养管 理、镌汰疫病循环撒播的焦点。 引进猪只治理:坚持自繁自养。引种时要严酷接纳检测和隔 离步伐.引种前需经由非洲猪瘟等重大动物疫病检测,抗原、抗体 检测效果及格,可举行场外或场内特定区域隔离检疫,确认清静方 可引种.对仅饲养育肥猪的猪场,所有空栏消毒后再购入仔猪,应 到非疫区、有优异声誉和信用的正规养猪场,经官方兽医检疫及格 后方可购进,亲近关注猪只康健情形. 逐日临床巡视排查:做好非洲猪瘟的一样平常巡视排查,便于早发 现、早检测、早处理。养殖场户要增强学习和掌握非洲猪瘟防控知 识,天天举行康健检查.一旦发明猪只体现精神欠好,厌食,体温 升高,皮肤发红,皮肤坏死斑块,枢纽肿大,母猪流产、乳房结痂等 临床症状,发病、殒命猪只增多的情形,可收罗口腔液、粪便拭子等 — 10 - 送检,发明阳性要实时向外地畜牧兽医部分报告. 猪只转运治理:猪只转运一样平常包括断奶猪转运、镌汰猪转运、 育肥猪出栏转运以及后备猪转运.凭证是否自有和可控,将运输 车辆分为两类:自有可控车辆可在猪场出猪间(台) 举行猪只转 运;非自有车辆不可靠近猪场出猪间(台) ,由自有车辆将猪只转 运到中转站(台)交 接. 售猪治理:榨取生猪贩运职员、承运职员等外来职员,以及外 来拉猪车辆进入养殖场。阻止场内外职员交织。猪场赶猪职员严 禁接触出猪间(台)靠近场外生猪车辆的一侧,外来职员榨取接触 出猪间(台) 靠近场内一侧.售猪前、后,连忙对出猪间(台)、停车 处、赶猪通道和装猪区域举行周全洗濯消毒。注重硬化出猪间 (台) 及周围区域、赶猪通道,利便冲洗、消毒,接纳防鼠、防雨水倒 流等步伐。
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